EP13 RNA定序分析



Background

RNAseq (RNA sequencing) 透過次世代定序 (NGS) 可以對樣品中RNA做高通量定序,由於基因轉錄出來的RNA片段,與定序產出的read數成正比,因此基因序列數量(read count),可用來代表該基因的表現量。RNAseq除了可用於量測基因表現量外,還可從RNAseq資料獲取其他轉錄體資訊更高的定序量及 Paired-End 定序方式可更準確深入探討到 transcripts 層級的基因表現 (Alternative Splicing post-transcriptional modifications, gene fusion, mutations/SNPs 等),亦可偵測 small RNA (如 miRNA, tRNA),Non-coding RNA (如 LncRNA)之表現狀態,完整分析轉錄過程中基因表現的狀況。 除此之外 , 近年的RNAseq還包含了single cell sequencing 及組織中的 in situ sequencing。

次世代定序所產生龐大的資料量,經過一連串的數據處理跟統計分析後,再利用軟體輕鬆繪製PCA,Heatmap及Volcano plot 等圖,得以協助我們快速找尋實驗中的差異表現基因 (Differential Expression Genes, DEG),進而獲得基因表現及功能註解 , 研究者可藉由基因差異表現在生物體中之意義進行實際的實驗探討。


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